概述：甜美素是食物出产中常用的甜味增添剂，其甜度是蔗糖的30～40倍,节制限量对人们的身材安康有首要意思。《GB 2760-2014 食物增添剂利用规范》顶用于界定食物增添剂利用规模的食物分类体系，白酒属于蒸馏酒，不许可利用甜美素。本体例参照GB/T 5009.97-2003及相干文献资料，对白酒中的甜美素经提取后，在冰浴前提下，与亚硝酸钠产生重氮化反映天生衍生物环己醇亚硝酸酯，衍生物进入气相色谱质谱联用仪停止分手检测。
1 尝试局部
1.1 仪器与试剂
江(jiang)苏🦋天(tian)瑞仪器股(gu)分无限公(gong)司气(qi)相色(se)谱-质谱联ཧ(lian)用仪：GC-MS 6800
甜美素规范储蓄溶液：称取必然量的甜美素规范品（纯度为99.0％）于枯燥容量瓶中，用水配成1000mｇ/kg规范储蓄溶液。
试剂均为优级纯，尝试用水为二次蒸馏水。
1.2 仪器任务前提
1.2.1
气相色谱前提
DB-5毛细管色谱（30m ×0.25mm,0.25um）；载气：氦气（纯度为99.999％），载气流量1.0mL/min；进样口温度250℃，进样量1.0uL，进样体例为分流进样,分流比10:1；法式升温：初始温度为40℃，坚持时候10min，以25℃/min速度升至270℃，坚持时候5min。
1.2.2
质谱前提
电子轰击离子源（EI），四级杆温度150℃，接口温度280℃；收罗体例为挑选离子监测扫描（SIM），溶剂提早时候6min,挑选3个监测离子质荷比（m/z）为55,81,83。
1.3 尝试体例（略）
2 成果与会商
2.1 特点和离子的挑选
甜(tian)美素的首要衍生物(wu)环(huan)己醇亚硝(xiao)酸酯作为定性(xing)和定量，如图1。保留时(🌊shi)候(hou)8.511min.定性(xing)离子（m/z）为55,81,83。定量离子为55。质谱图见(jian)图2.
图1、柔美素诞生物在总阴离子流色谱图
ꦓ🥀Figure 1、 Cyclamate derivatives total ion
chromatogram
图2、柔美素衍(yan)生物物的质谱图
Figure 2、 Cyclamate derivative spectrum
图3、可爱素发展物(wu)在SIM扫锚(mao)下的阴阳离子流色谱图
Figure 3、 Cyclamate
derivative S🍷IM under scanning ion chromatogram
图(tu)(tu)4、甜甜的素ip🐽产业物在SIM扫描器(qi)下的质谱图(tu)(tu)
Figure 4、 Cyclamate derivꦓative SIM
under sca🎃nning spectrum
2.2 前处置前提挑选
2.2.1 研究同时挑选到
精确吸收的1ml甜美素储蓄液溶液根据上述衍生步骤停止衍生化，甜美素衍生物浓度为200ug/mL，衍生反映时候别离设置为10min、20min、30min、40min、50min，考查反映时候对反映的影响。成果标明，跟着时候从10min升至30min，衍生物旌旗灯号呼应值逐步增添，跟着反映时候的耽误，呼应值反而呈现下降，是以，衍生反映温度30min最好。
2.2.2
硫酸浓度的挑选
精确吸收的1mL甜美素储蓄液溶液根据上述衍生步骤停止衍生化，甜美素衍生物浓度为200ug/mL，冰浴反映前提下，插手50g/L的亚硝酸钠和别离为50g/L，75g/L，100g/L，125g/L，150g/L。成果标明，酸度从50g/L至100g/L，反映衍生物旌旗灯号呼应值较着增添，浓度降低时，呼应值呈现削减，是以，终究衍生反映酸度为100g/L。
2.2.3 亚硝酸钠浓度对衍生反映的影响
精确吸收的1ml甜美素储蓄液溶液根据上述衍生步骤停止衍生化衍生化，甜美素衍生物浓度为200ug/mL，冰浴反映前提下，插手100g/L的硫酸，和别离为30g/L，50g/L，70g/L，90g/L亚硝酸钠。成果标明，酸度从30g/L至50g/L，反映衍生物旌旗灯号呼应值较着增添，浓度降低时，呼应值呈现削减，是以，终究亚硝酸钠衍生反映为50g/L。
3 尝试数据
3.1 精密度和反复性尝试
精(jing)确移(yi)取储蓄液(ye)500uL于离心管中，用水定(ding)容20mL根(gen)据上述标(biao)样衍(yan)生(sheng)(sheng)步骤停止衍(yan)生(sheng)(sheng)化(hua)，衍(yan)生(sheng)(sheng)物浓度为100ug/mL，平行制备反映液(ye)6次，🍌用GC-MS测定(ding)。考查衍(yan)生(sheng)(sheng)体(ti)例的重现性和组分保(bao)(bao)留(liu)时候和峰面(mian)积(ji)的绝(jue)对规范误差，6个平行样的谱。成果标(biao)明，保(bao)(bao)留(liu)时候🌟RSD为0.98%，峰面(mian)积(ji)RSD为6.00%,，具体(ti)尝试数据以下表1所示 。
表1、重复多次性测试仪优秀成果
Table 1, repeatable test results
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产品的样品光环
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使用是
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抹去阶段RSD%
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峰适用面积
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峰的面积RSD%
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1
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8.611
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0.98%
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96798
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6.00%
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2
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8.518
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99549
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3
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8.406
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105518
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|
4
|
8.431
|
99798
|
|
5
|
8.411
|
87708
|
|
6
|
8.410
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96500
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3.2 线性干系和检测限
精确吸收浓度为10ug/mL的甜美素规范溶液10ul于50ml离心管中对应衍生物浓度别离为2ug/mL、10ug/mL、20ug/mL、100ug/mL、200ug/mL，根据上述标样衍生化步骤停止衍生化，停止线性测试。尝试所得线性方程为：y=940.43x-3525.57，线性相干系数为0.9984，如图5所示。
图5. 线性干系图
Figure 5，Linear
3.3 收受接管率测试
挑选2mg/kg、50mg/kg、200mg/kg的标样增添浓度，对某品牌白酒停止收受接管率尝试，每一个浓度别离做三次平行样，按处置样品的体例处置加标后的样品并测试，接纳外标法定量，测试成果以下表2所示。
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溶(rong)液浓度/mg/kg
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收受打压率(lv)1/%
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收受(shou)对接(jie)率2/%
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收受收回(hui)率3/%
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平滑(hua)收受(shou)收回(hui)率/%
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2
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109.6
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104.7
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107.7
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107.3
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50
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99.84
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113.7
|
103.5
|
105.7
|
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200
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108.3
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114.9
|
116.7
|
113.3
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表2、收受接管率测试成果
Table 2, the recovery test results
3.4 现实样品测试
根据上述样品(pin)处置体例对差别品(pin)类(lei)的白酒样品(pin)停止前处置和衍生(sheng)化，利用GC-MS6800停止测(ce)试，测(ce)试成果(guo)以下表(biao)3所💦示：
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样品管理
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可爱素含铁/mg/kg
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酒试样1
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N.D.
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酒打样(yang)定(ding)制(zhi)2
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N.D.
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酒样(yang)件3
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N.D.
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酒(jiu)样件4
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N.D.
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酒(jiu)土样(yang)5
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N.D.
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注：“N.D”表现“未检出”
表3.、酒中甜美素含量测试成果
4 论断
本尝试接纳GCMS-6800，在SIM扫描形式下对酒中的甜美素停止测试和阐发，体例不变靠得住，线性规模好，活络度高，受杂质峰的搅扰小，可以或许有用地对酒中的甜美素停止定性定量阐发。
